在實驗室,人人都是「配槍」高手,
小小的移液器一抽一吸之間就能精確地量取溶液,
非常簡單方便。
然而,這把形影不離的「槍」,
你真的會用TA嗎?
今天,讓我們嘮一嘮關(guān)于移液器精準(zhǔn)移液的知識。
正確使用
移液器包括以下幾個環(huán)節(jié):
1、設(shè)定體積
量程設(shè)定的原則是由大到小,所以在調(diào)節(jié)容量時,如果要從大體積調(diào)為小體積,如200μL調(diào)為100μL,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕至所需要的容量即可;
但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕至超過目的容量值的1/4圈,再調(diào)至設(shè)定值,這樣可以使彈簧完全放開,排除機械間隙,使設(shè)定量值準(zhǔn)確,保證量取的精確度、延長移液器的使用壽命。
需要注意的是,在該過程中,千萬不要將按鈕旋出移液器的最大量程,否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液器。
2、安裝吸頭
為保證良好的密封性,安裝吸頭前要選擇適配于移液器量程的吸頭。
移液器吸頭的安裝采用旋轉(zhuǎn)安裝法。掌心和四根手指握住槍柄,食指緊靠前端鉤狀結(jié)構(gòu),大拇指放在控制按鈕上,將移液器垂直插入吸頭,輕輕用力下壓的同時,把手中的移液器左右旋轉(zhuǎn)半圈或順時針旋轉(zhuǎn)180°,上緊保證沒有空隙,否則試劑會漏出。此時需要注意,不要用力過大。
將吸頭套上移液器時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做法,具體原因如下:
①在撞擊的作用下,吸頭可能會變形而影響移液精度;
②移液器套柄接觸吸頭的部分經(jīng)過多次強力的摩擦,會逐漸變得粗糙而難以保證密封性, 而為了達到良好的密封性就需要更大的撞擊力,惡性循環(huán)就此開始;
③小量程的移液器的套柄都比較細(xì),在不斷撞擊的摧殘下,很有可能變成釣魚鉤;
④有時這種沖擊力比移液器掉在地上承受的力還要大,移液器里的部分精密部件隨時有不堪重負(fù)而罷工的可能。
3、潤洗吸頭
在移液之前,為使測量準(zhǔn)確可以先吸放幾次液體以潤洗吸頭,尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時。
對于常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準(zhǔn)確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準(zhǔn)確性,所以高溫或低溫液體不要潤洗吸頭,請使用者特別注意。
4、精準(zhǔn)移液
(1)移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度,溫度偏高或偏低都會影響移取的液體體積。
(2)吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將移液器吸頭垂直浸入液面下1-6mm(具體視移液槍容量大小而定):0.1-10μL容量的移液器進入液面下1-2mm; 2-200μL容量的移液器進入液面下2-3mm; 1-5mL容量的移液器進入液面下3-6mm。過多過少都不建議,伸入過多會造成移液管的外壁沾有過多溶液,移液時造成體積誤差;伸入太少在液面下降之后容易吸空,造成移液作廢。
(3)移液有兩種方法:
①正向移液:按動移液器按鈕至第一停點,輕緩松開按鈕到起始點完成吸液,輕按按鈕至第一停點,排除液體;稍停片刻,繼續(xù)按按鈕至第二停點,排空液體,松開按鈕回到原點。如果需要,更換吸頭后繼續(xù)移液。
正向移液法適用于密度較低的溶液。
②反向移液:按動移液器按鈕至第二停點,輕緩松開按鈕到起始點完成吸液。吸取多于設(shè)定容量的液體,輕按按鈕至第一停點,排除液體,殘留在吸頭內(nèi)的多余液體隨吸頭丟棄。
反向移液法適用于粘稠液體、揮發(fā)或易產(chǎn)生氣泡的溶液。
(4)緩慢取出槍頭,移液器移出液面前略等1-3秒;1000μL以下停頓1秒;5-10mL停頓2-3秒。確保槍頭外壁無液體。
5、卸去吸頭
按壓彈射鍵彈射出吸頭。
移液器用完后調(diào)回最大量程,以免壓縮彈簧導(dǎo)致彈簧不能恢復(fù)。
使用完畢,可以將其豎直掛在移液器架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置.以兔液體倒流腐蝕活塞彈簧。
注意事項:
1、使用前需要先校正,一般三個月校正一次。如果使用不頻繁,可半年校正一次。校正方法可采用稱量校正,即20℃時1mL蒸餾水=0.9982g (需要用萬分之一的電子分析天平)。
2、選擇合適量程的移液器,建議移液范圍在移液器量程的35%-100%內(nèi)。
3、一定要用與移液器相匹配的吸頭。
4、不要將按鈕旋出最大或最小量程范圍之外,否則會卡住機械裝置,損壞移液器。
5、不要傾斜移液。
有人以為適當(dāng)傾斜有助于吸液干凈,還更靈活,這是絕對錯誤的。移液角度對準(zhǔn)確性有較大影響,保證吸液或排液時偏離垂直不可超過20°,否則影響準(zhǔn)確性。
6、嚴(yán)禁用移液器吹打混勻液體。
7、吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,吸液太快會產(chǎn)生氣泡,液體浸入移液器內(nèi)部造成內(nèi)部器件腐蝕。
8、使用過的槍頭不能和新吸頭混放,以免產(chǎn)生交叉污染。
9、定期清潔移液槍外壁,可以用95%酒精或60%的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干。
10、移液器如果需要消毒可以用紫外照,或者用75%酒精擦拭,切不可近火。
11、移液器存放時保持豎直存放,不要平放。在移液操作過程中,難免會有液體進入移液器的內(nèi)部,在平放的狀態(tài)下,這些液體就會一直滯留在活塞等部件上,日積月累之后污染活塞甚至腐蝕活塞。
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