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凱氏定氮蛋白質(zhì)測定注意事項
發(fā)布日期：2023/2/16 9:01:15

普通注意事項：

1.原則上樣品越少，越容易消化，但樣品越少，計量的誤差可能性也越大，所以控制到蛋白質(zhì)含量為0.10g左右，加入0.2g硫酸銅、3g硫酸鉀及20ml濃硫酸應(yīng)是比較合理的消化方法。

2.消化過程中，液化較完全時可以搖動一次，把所有的黑色物質(zhì)搖洗下來，搖動方法是取下漏斗，戴上棉手套，用手掌緊握瓶頸，由前向側(cè)后甩，液體的狀態(tài)是半旋轉(zhuǎn)半振蕩，注意控制力度不要讓液體濺離瓶口

3.變色時因為是緩慢變色，所以可以兩種方法計時，一是完全變色后半小時即停止消化，二是剛變色后一個小時停止消化。

4.消化液完全冷卻后才能加水、轉(zhuǎn)移、定容，這三個步驟都會導(dǎo)致發(fā)熱，所以必須確保水溶液最后在定容到刻度時冷卻到室溫，當(dāng)然要多次洗滌凱氏燒瓶（即凱氏定氮瓶）以確定轉(zhuǎn)移完全。
5.消化液最好不要放置過液，需要過夜測定時，請先轉(zhuǎn)移定容好消化液。定容好的消化夜也不能放置時間太久（如幾天）才進(jìn)行蒸餾滴定。
6.蒸餾時，加樣液過程可以從容操作，但是加堿后，必須緊密有序，堿的流入過程應(yīng)是充滿整個漏斗口的，在堿還沒有放完時就應(yīng)準(zhǔn)備好加水以封住漏斗口，確保蒸發(fā)器中已有氨從漏斗口泄漏，而導(dǎo)致結(jié)果偏低。
7.加入的氫氧化鈉溶液除與硫酸銨作用外，還與消化液中的硫酸和硫酸銅作用，若加入的氫氧化鈉不夠，則溶液呈藍(lán)色，不生成褐色的氫氧化銅沉淀。所以，加入的氫氧化鈉必須過量，并且動作還要迅速，以防止氨的流失。

8.凱氏定氮儀停止蒸餾時，由于反應(yīng)室外層的壓力突然降低，可使液體倒吸入反應(yīng)室外層，所以，操作時，應(yīng)先將冷凝管下端提高液面并清洗管口，再蒸一分鐘后關(guān)掉熱源。蒸餾是否完全，可用精密ＰＨ試紙測冷凝管口的冷凝液來測定，中性則說明已蒸餾完全。

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